實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。

（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì)；2. 電子ding載天平（感量0.01g）；3. 研缽；4. 棕色容量瓶；5. 小漏斗；6. 定量濾紙；7. 吸水紙；8. 擦境紙；9. 滴管。

（三）試劑：96%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。

 

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。3. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?. 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。后用乙醇定容至25ml，搖勻。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白，在波長665nm、649nm下測定吸光度。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.9665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總?cè)~綠素的濃度。后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：

葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）。